Seebio® 碱性磷酸酶(ALP),硫酸铵分散液

  • 别名:碱性磷酸酶,Alkaline phosphatase.ALP.9001-78-9
  • 编码:DCE0108H
  • 级别:≥2000 U/mg,硫酸铵分散液
  • 简介:本产品是一种重组碱性磷酸酶(ALP),通过CHO-K1 细胞表达,经多步层析纯化获得。碱性磷酸酶的活性依赖于Mg2+的存在,砷酸盐、L-苯丙氨酸、半胱氨酸、碘、无机磷酸盐、焦磷酸盐等对酶的活性有抑制作用。
品牌 货号 包装规格 库存 价格 数量
Seebio DCE0108H-1mg 1mg 283 元
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Seebio DCE0108H-10mg 10mg 2,408 元
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基础信息

产品名称Seebio® 碱性磷酸酶(ALP),硫酸铵分散液
英文名称Alkaline Phosphatase
缩写ALP、AKP、AP
CAS No.9001-78-9
酶活定义在37℃、pH 9.5条件下,一个单位的碱性磷酸酶每分钟能够水解对硝基苯酚磷酸盐(pNPP)产生1µmol对硝基苯酚(pNP)。

产品介绍

本产品是一种重组碱性磷酸酶(ALP),通过CHO-K1 细胞表达,经多步层析纯化获得。碱性磷酸酶的活性依赖于Mg2+的存在,砷酸盐、L-苯丙氨酸、半胱氨酸、碘、无机磷酸盐、焦磷酸盐等对酶的活性有抑制作用。
ALP可用于蛋白质的去磷酸化(如酪蛋白),也可用于 DNA 或 RNA 的 5′-末端去磷酸化。ALP与抗体或其他蛋白偶联后,能够特异性示踪靶标分子,这在ELISA、免疫印迹和组织化学检测中得到了广泛应用。
【产品特点和优势】
1、本产品由CHO-K1 细胞重组表达,因真核细胞良好的翻译后修饰,保障了酶的高活性;
2、本品经基因工程改造,显著提高了酶的热稳定性和杂质耐受性;
3、本品在用于ELISA、WB 和组织化学检测中,有良好的灵敏度和结果重现性。
【运输、储存条件和有效期】
低温运输(不可结冰),2-8 ℃ 保存,有效期一年。
【储存缓冲液】
3M (NH4)SO4 缓冲液。
【使用建议】
本品为悬浮液,使用前请12000rpm离心10分钟收集沉淀,然后用PBS将沉淀重新溶解,并调整到合适浓度。
应用1. DNA 或 RNA 的 5′-末端去磷酸化:调整反应液中ALP的酶活浓度至0.2U/μl,37℃反应30分钟,90℃孵育15 分钟灭活ALP。
应用2. 蛋白标记:标记方法有多种,下述为戊二醛法:
(1)用PBS溶解抗体和碱性磷酸酶,至终浓度分别为5mg/ml和10mg/ml;
(2)将1.5mg 的碱性磷酸酶(150ul)和0.5mg 的抗体(100ul)混合,总体积250 μL;
(3)加入30 μL 5%的戊二醛,室温震荡混合2小时;
(4)加入 PBS 至终体积1 mL,对 PBS (约2 L) 4°C 透析过夜;
(5)用保存液(50 mM Tris-HCl pH7.5,1 mM MgCl2, 0.02% NaN3, 2% BSA)将透析好的标记抗体溶液稀释至10 mL,4℃可稳定保存2年以上。

参考文献: Wisdom GB. Conjugation of antibodies to alkaline phosphatase. Methods Mol Biol. 2005;295:123-6.
本产品是一种重组碱性磷酸酶(ALP),通过CHO-K1 细胞表达,经多步层析纯化获得。碱性磷酸酶的活性依赖于Mg2+的存在,砷酸盐、L-苯丙氨酸、半胱氨酸、碘、无机磷酸盐、焦磷酸盐等对酶的活性有抑制作用。
ALP可用于蛋白质的去磷酸化(如酪蛋白),也可用于 DNA 或 RNA 的 5′-末端去磷酸化。ALP与抗体或其他蛋白偶联后,能够特异性示踪靶标分子,这在ELISA、免疫印迹和组织化学检测中得到了广泛应用。
【产品特点和优势】
1、本产品由CHO-K1 细胞重组表达,因真核细胞良好的翻译后修饰,保障了酶的高活性;
2、本品经基因工程改造,显著提高了酶的热稳定性和杂质耐受性;
3、本品在用于ELISA、WB 和组织化学检测中,有良好的灵敏度和结果重现性。
【运输、储存条件和有效期】
低温运输(不可结冰),2-8 ℃ 保存,有效期一年。
【储存缓冲液】
3M (NH4)SO4 缓冲液。
【使用建议】
本品为悬浮液,使用前请12000rpm离心10分钟收集沉淀,然后用PBS将沉淀重新溶解,并调整到合适浓度。
应用1. DNA 或 RNA 的 5′-末端去磷酸化:调整反应液中ALP的酶活浓度至0.2U/μl,37℃反应30分钟,90℃孵育15 分钟灭活ALP。
应用2. 蛋白标记:标记方法有多种,下述为戊二醛法:
(1)用PBS溶解抗体和碱性磷酸酶,至终浓度分别为5mg/ml和10mg/ml;
(2)将1.5mg 的碱性磷酸酶(150ul)和0.5mg 的抗体(100ul)混合,总体积250 μL;
(3)加入30 μL 5%的戊二醛,室温震荡混合2小时;
(4)加入 PBS 至终体积1 mL,对 PBS (约2 L) 4°C 透析过夜;
(5)用保存液(50 mM Tris-HCl pH7.5,1 mM MgCl2, 0.02% NaN3, 2% BSA)将透析好的标记抗体溶液稀释至10 mL,4℃可稳定保存2年以上。

参考文献: Wisdom GB. Conjugation of antibodies to alkaline phosphatase. Methods Mol Biol. 2005;295:123-6.

质量指标

Specific activity≥2000 U/mg
AppearanceSuspension

MSDS

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