辣根过氧化物酶(HRP)

  • 别名:Horseradish Peroxidase;9003-99-0
  • 编码:ECE0066M
  • 级别:290-330U/mg,RZ≥3.0
  • 简介:辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP, CAS#9003-99-0),来源于辣根,在临床检验中有广泛的作用。既可以用作生化反应中的指示剂,也可以用作免疫反应(尤其是ELISA)中标记试剂,是酶标抗体的关键原料。辣根过氧化物酶作为多个试剂盒显色体系的关键成分,对试剂盒的质量有重要影响。
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基础信息

产品介绍

辣根过氧化物酶
辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP, CAS#9003-99-0),来源于辣根,在临床检验中有广泛的作用。既可以用作生化反应中的指示剂,也可以用作免疫反应(尤其是ELISA)中标记试剂,是酶标抗体的关键原料。辣根过氧化物酶作为多个试剂盒显色体系的关键成分,对试剂盒的质量有重要影响。西宝生物提供优质的辣根过氧化物酶(HRP),纯度高,稳定性好,咨询热线400-021-8158。
HRP广泛分布于植物界,辣根中含量高,它是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白,糖含量18%,主要有甘露糖、木糖、阿拉伯糖和己糖胺等。HRP由多个同工酶组成,分子量为40,000,等电点为PH3~9,酶催化的最适PH因供氢体不同而稍有差异,但多在PH5左右。
Seebio 辣根过氧化物酶:
【名称】辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)
【货号】ECE0066M
【外观】冻干粉
【CAS】9003-99-0
【来源】Armoracia rusticana
【保存条件】-20℃保存
【有效期限】2 年
西宝生物辣根过氧化物酶的质量指标
项目指标值
RZ
≥3.0
活性(U/mg, 固体 )
290~330U/mg
外观
棕褐色无定形粉末
RZ值对于辣根过氧化物的意义:
每一个HRP分子中含一个氯化血红素IX作辅基,该辅基在403nm波长处有最大吸收峰,而去辅基的酶蛋白在275nm波长处有最大吸收。RZ(Reinheits Zahl)值即为HRP在403nm的OD值(血红素引起的吸收率)与275nm的OD值(蛋白质引起的吸收率)之比。
辣根过氧化物酶的用途:
辣根过氧化物酶是目前使用最广泛的一种标记酶,用来标记抗体或其它蛋白质,既能用于定位检测,也能用于定量测定。 辣根过氧化物酶(HRP)的从辣根根(Amoracia RUSTICANA)中分离。它是用于生物化学中的应用,如western印迹,ELISA和免疫组化。辣根过氧化物酶是用来放大弱信号,增加被探测的目标分子,如蛋白质。它通常被用于确定葡萄糖和溶液中的过氧化物的量。它也被用于在烟曲霉快速药敏测定。
产品类型主要应用
RZ>3 活性>250u/mg
主要应用于免疫学上抗体的标记,是高纯度的过氧化酶。采用特殊色谱纯化技术以除去会影响免疫学反应的同工酶B ,可作为酶免类体外诊断试剂盒的开发原料。
RZ>2 活性>180u/mg
主要应用于临床生化,例如总胆固醇检测(TC)、HDL-C、LDL-C、甘油三酯(TG)检测等,亦可用于实验初期蛋白质、抗体等标记。
RZ>1 活性>100u/mg
主要应用于生化领域血糖试纸和尿液分析试纸。
辣根过氧化物酶HRP是目前在ELISA中应用最为广泛的标记用酶,主要原因一方面是其易于提取,价格相对低廉;另一方面性质稳定,耐热及有机溶剂的作用,与抗原或抗体偶联后,活性很少受损失。西宝生物隆重推出用于免疫标记的辣根过氧化物酶HRP(RZ≥3.0,活性≥290U/mg),详情致电400-021-8158。以下就辣根过氧化物酶HRP标记抗体的过程做下详细介绍。
辣根过氧化物酶HRP标记抗体步骤
1) 透析膜依次浸泡于50%乙醇1h,10mmol/L NaHCO3 1h, 1 mmol/L EDTA 1h,在蒸馏水中洗两次并放于含0.01% (m/V)叠氮钠的0.1mol/L磷酸钠缓冲液,于4℃保存。
2) ≥1mg/ml抗体溶液(A280=1.44mg IgG/ml)对2L 0.1mol/L pH6.8的磷酸钠缓冲液透析,于4℃缓慢搅动下过夜。
3) 10mgHRP溶解于1ml0.1mol/LpH9.2的碳酸盐缓冲液,取0.25ml加入0.25ml新配制的1.71 mg/ml NaIO4溶液中,盖紧混匀,于室温下避光放置2h。
4) 取1ml透析后的抗体溶液和0.25g SephadexG-25加至0.5mlHRP/NaIO4混合液中。用玻璃棉塞紧巴斯德吸管管尖并用Parafilm封口膜封好。将抗体/葡聚糖凝胶/HRP混合物加人巴斯德吸管,室温下避光放置3h。
5 )柱子用0.75ml碳酸盐缓冲液洗脱偶联物。加38μl 5mg/mlNaBH4溶液至洗脱物中,室温下避光孵育30min。再加112μl 5mg/ml NaBH4溶液继续孵育60min。
6) 加0.9ml饱和硫酸铵溶液,于4℃下温和搅拌30min。于4℃,10000g离心15min。
7) 弃上清。沉淀重溶于0.75 ml TEN缓冲液中,装人透析袋于4℃对2 L TEN缓冲液透析过夜。更换TEN缓冲液再继续透析4h。
8) 从透析袋中取出偶联物,加BSA至20mg/ml。加等体积甘油,于-20℃保存。
订购信息:
产品编号
产品名称
等级
包装
价格
ECE0066M
Peroxidase from horseradish
辣根过氧化物酶HRP
290-330U/mg,RZ≥3.0

100mg

1g

850.00
  4500.00
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质量指标

RZ≥3.0
活性(U/mg, Solid )290~330U/mg
性状棕褐色粉末

MSDS

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