Seebio® 线性聚乙烯亚胺（PEI 40,000）（粉末）

【产品描述】

PEI是一种高电荷阳离子聚合物，易结合负电荷的核酸分子形成复合物，由此介导核酸进入细胞中。PEI用于核酸转染具有高效、成本低、稳定等特点，适用于HEK293、CHO等多种细胞系的瞬时转染或稳定转染。本产品分子量为40,000Da，外观为白色至灰白色固体。

【储存条件】

4℃保存，有效期两年。

【使用方法】

l  溶解配制

1.将10mg PEI粉末加入8ml超纯化水中，用2N盐酸调节pH至3.0±0.1，72℃搅拌溶解（约5min）；

2.用2N氢氧化钠溶液调节pH为7.0±0.1，加水定容至10ml；

3.用0.1~0.2um无菌过滤器过滤除菌，即得到1mg/ml的储存液；

4.分装并储存在4℃，3个月内稳定；-20℃长期储存，有效期1年，避免反复冻融。

l  细胞转染

1.转染前一天铺板细胞，以转染时细胞汇合度到70%-80%为宜，并更换成新鲜的完全培养液；

2.准备DNA-PEI复合物：用不含血清的培养基稀释DNA至浓度为20ng/ul，取适量PEI加入DNA溶液中（建议DNA和PEI的质量比控制在1:1~1:3），室温孵育15-30min，形成DNA-PEI复合物。

3.直接将DNA-PEI复合物加入细胞中，轻轻混匀，继续培养4h-6h后更换含血清的培养基。

4.对于瞬时转染，通常在转染后24-48小时后检测产物表达；对于稳定转染，12-24小时后传代并进一步通过筛选培养基培培养获得稳定整合的细胞克隆。

【参考用量】

针对不同培养皿，您可以参考下表制备转染复合物，但最佳转染条件往往需要更多比例的测试。

实例 利用Seebio® 线性聚乙烯亚胺转染CHO-K1

Ø 细胞类型：CHO-K1

Ø 转染时间：48h

Ø DNA：eGFP/RFP双表达质粒

Ø DNA/PEI=1：2

【注意事项】

本产品仅限于科学研究用，不得用于食品或药品。请穿着实验服并穿戴一次性手套操作。