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酵母

发布时间:2021-06-09 点击数:85
酵母菌发酵是最经济的真核表达系统,可大规模生产需要翻译后修饰的分泌蛋白和细胞内蛋白,包括人源化抗体。发酵和表达服务,自有的酵母发酵技术,集高产量、高效和类似哺乳动物表达系统的特点为一体,蛋白表达持久、稳定。
服务特点
  • g级蛋白生产: 适用于工业酶的定制生产。
  • 高产量: 与大肠杆菌相比,蛋白产量增加2倍;酵母发酵产量5~10g/L。
  • 稳定生产工艺: 目的蛋白表达元件被整合到基因组中,形成稳定的蛋白表达过程。
酵母表达纯化服务详情
客户提供
步骤
详情
周期
交付标准
目的序列(DNA或蛋白)/DNA模板/表达载体
基因合成和亚克隆(可选)

·亚克隆至适当的表达载体中 

·质粒大抽
·构建线性化载体
2周
载体构建报告
表达和评估
·将线性载体转化至适合的宿主
·通过PCR方法确定阳性转化株
·表达确认
·SDS-PAGE和/或Western blot
2周
表达报告
1L表达和纯化
·1L酵母培养表达
·一步纯化或多步纯化达到≥90%纯度
·*QC检测,包括SDS-PAGE、Western blot和LC-MS/MS覆盖率检测
2周
·纯化的蛋白
·QC报告
放大生产和纯化(可选)
·至多2,000L的大规模生产(使用发酵罐以及TFF大规模过滤系统)
·交付的蛋白纯度高达90%及以上
·标签去除
2-3 周
·酵母胞浆/已纯化的蛋白
·QC报告
* QC:SDS-PAGE用于检测纯度;BCA或Bradford用于检测蛋白浓度;使用Anti-His和Anti-GST进行Western blot检测蛋白纯度(可选);LC-MS/MS覆盖率检测用于确定目的蛋白(可选)。
如果不需要下游蛋白纯化的酵母发酵服务,请从下表选择灵活规模的酵母发酵服务。
酵母发酵服务详情
客户提供
发酵体积
周期
交付标准
类型
·目的序列
·DNA/表达载体
·甘油菌
·微生物生长平板
5L
1~2周
·酵母胞浆
·批次记录
·QC数据表
可选:
·正常发酵
·高密度发酵
10L
20L
50L
100L
2~3周
200L
300L
500L
3~4周
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