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人鼠嵌合抗体表达

发布时间:2021-06-09 点击数:550
基因工程抗体的发展极大地推动了抗体技术的进步以及抗体药物和诊断试剂的研发。制备基因工程抗体涉及一整套步骤,包括基因克隆、载体构建、表达筛选、抗体制备和亲和力测定等。西宝生物提供技术支持,以协助您成功进行基因工程抗体的制备过程。
通过先进的技术平台和专业的技术人员,西宝生物能够将您的鼠源单克隆抗体进行人源嵌合化改造,或者将您的小分子抗体进行全长改造。利用DNA重组技术,西宝生物可以将鼠单抗的轻链和重链可变区基因插入含有人抗体恒定区的表达载体中,然后将其转化为哺乳动物细胞,从而制备出人鼠嵌合抗体。这些嵌合抗体的人源化程度可达到约70%,充分保留了异源单抗的可变区,最大限度地保持了其亲和性,并降低了免疫原性。
嵌合单克隆抗体的定义与原理
嵌合抗体是将一个物种(如小鼠)的可变区与另一个物种(如人类)的恒定区结合而形成的结构性嵌合体。它是开发治疗性单克隆抗体时降低免疫原性、延长血清半衰期的重要步骤。通过将一个物种的恒定区替换为另一个物种的恒定区,甚至在同一物种内将一个亚型替换为另一个亚型,可以实现抗体的人源化。然而,这个过程可能具有挑战性。
西宝生物提供嵌合抗体的构建和生产服务,涵盖人、小鼠、兔、大鼠、犬等多种物种。您只需提供抗体全长序列或可变区基因序列,我们将为您交付高质量的嵌合抗体。随时欢迎咨询,西宝生物的技术专家将为您提供支持。
嵌合抗体制备过程与应用
制备人-鼠嵌合单克隆抗体
如何制备人-鼠嵌合单克隆抗体
服务内容
嵌合抗体是通过基因工程技术制备的,即将选定的小鼠杂交瘤免疫球蛋白(Ig)的可变区与人Ig的恒定区连接起来,构建嵌合抗体。制备过程包括以下步骤:
1.收集小鼠脾脏并分离B细胞。
2.融合B细胞与骨髓瘤细胞,形成杂交瘤细胞,筛选出抗原特异性IgG阳性克隆。
3.分离小鼠VH和VL的DNA序列,以及人免疫球蛋白恒定区的DNA序列。
4.通过基因工程构建小鼠/人嵌合基因,将其转染至哺乳动物细胞。
5.选择高表达嵌合IgG的克隆,并从培养上清液中纯化IgG。
嵌合抗体在治疗和免疫测定中具有重要应用。在免疫组织化学或ELISA等检测中,通过转换抗体恒定区以匹配宿主或二抗的物种,可以显著降低背景染色等问题。
服务信息
电话: 400-021-8158
 

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