Seebio® 1st Strand cDNA Synthesis Kit

【基本信息用途】

本产品是使用Seebio®  Reverse Transcriptase，以总RNA或m RNA为模板合成1st Strand cDNA的试剂盒，含有所需的全部试剂。Seebio®  Reverse Transcriptase，是一种大肠杆菌重组表达的改进型鼠白血病逆转录酶，具有高温反应、优越的持续合成能力和强的杂质耐受能力，逆转录温度可提高至50~55℃，避免RNA复杂二级结构对cDNA合成的抑制。可提供更高的全长cDNA产量。合成的1st Strand cDNA可广泛应用于第二链合成、杂交、PCR、qPCR 反应等。

【试剂盒组成】

【特点和优势】

(1)逆转录效率高、产量优异：Seebio® Reverse Transcriptase缺失了RNA酶H活性，具有更强的延伸能力和稳定性，具有更好的逆转录效率，可提供较普通逆转录酶更高的全长cDNA产量；
(2)耐热性及稳定性强：逆转录酶耐受高温的能力是cDNA合成的重要影响因素，Seebio® Reverse Transcriptase在50-55℃下具有更高的热稳定性和更长的半衰期；
(3)杂质耐受度强：对常见杂质（乙醇、异丙醇、水平衡酚、异硫氰酸胍、腐殖酸）均具有强的耐受度。

【用途】

以mRNA或者总RNA为模板，合成第一链cDNA：

1、RNA的逆转录，cDNA的克隆、基因表达

2、设备制造商配套检测用试剂，如数字PCR仪、荧光定量PCR仪

【使用建议】

1.需准备的主要试剂和仪器
恒温水浴锅、琼脂糖凝胶、电泳仪、离心机、移液器和枪头等。注意操作过程应RNase-Free。

2.1st strand cDNA 合成反应
(1)按下表配制反应液

(2)缓慢混匀后，进行逆转录反应：30℃10 min， 50℃30-60 min。

(3)反应结束后，95℃保温5 min使酶失活，-20℃保存。长片段cDNA合成时，70℃ 15 min失活处理可保障片段有更好的完整性。