Seebio® 辣根过氧化物酶（HRP）
- 别名：Horseradish Peroxidase；9003-99-0
- 编码：ECE0066U
- 级别：
- 简介：辣根过氧化物酶（HRP）分离自辣根中， 它可用于生物化学应用，如蛋白质印迹、ELISA和免疫组织化学。 辣根过氧化物酶可用于扩增弱信号并增加靶分子（例如蛋白质）的可检测性。
基础信息
| 中文名 | Seebio® 辣根过氧化物酶（HRP） |
| 英文名 | Horseradish Peroxidase |
| Mol.Weight | 44kDa |
产品介绍
【产品基本信息和用途】
辣根过氧化物酶（Horseradish Peroxidase, HRP）是一种糖蛋白，从辣根（Horseradish）中提取。HRP分子量为44,000，等电点为pI 3～9，是一个球状分子，被血红素铁分成远端区和近端区。血红素铁与HRP共价连接。HRP的纯度通常可通过A403与A280的比值（RZ值）来检测。然而，不同的同工酶在相同纯度下会有不同的RZ值。适合HRP酶催化的pH值因供氢体不同而稍有差异，但多在pH 5左右。已知叠氮化钠，氰化物，L-胱氨酸，重铬酸盐，亚乙基硫脲，羟基胺，硫化物，钒酸，对氨基苯甲酸等能够抑制HRP活性，Cd2+，Co2+，Cu2+，Fe3+，Mn2+，Ni2+和Pb2+离子具有酶活抑制作用。HRP在组织化学染色和诊断分析中被广泛用作报告酶。在有机合成中，HRP被用于聚合反应、氧化脱氢反应和磺化氧化反应。HRP还被用作电化学生物传感器，在生物修复系统中用于降解合成染料等。
【应用举例】
高碘酸盐法抗体交联
1、将HRP溶解于含有8mM高碘酸钠的0.1M碳酸钠中，浓度为1mg/mL；
2、室温放置2小时，使HRP被充分氧化；
3、按HRP:IgG=1:7(mg/mg)的比例加入过量的IgG，然后加入HRP和IgG总质量1/6的干燥Sephadex，以破坏未反应的高碘酸盐；
4、室温孵育3小时；
5、过滤去除Sephadex，保留溶液；
6、加入l/20 体积的新鲜硼氢化钠溶液（5 mg/ml，溶解在0.1 mM氢氧化钠中），半小时后重复加入3/20 体积的新鲜硼氢化钠溶液，保持1小时。
7、用50%硫酸铵沉淀HRP-IgG偶联物，未交联的自由IgG用Con A亲和层析（PBS-NaC1平衡）去除，结合在柱上的HRP-IgG用0.01 M α-甲基D-吡喃甘露糖苷洗脱。
参考文献：1. Anal Biochem. 1984 Feb;136(2):451-7;
参考文献：2. Arch Virol. 1982;74(4):277-91.
【酶活定义】
在25 ℃，pH7.0时，每分钟催化转化一个微摩尔过氧化氢的酶量。
【产品组分】
冻干粉，无添加成分。
【质量指标】
项目 | 指标 |
来源 | 辣根 |
分子量 | 44kDa |
活性 | ≥250U/mg |
RZ值 | 2.5-4.0 |
外观 | 褐色结晶性冻干粉状 |
【运输、储存条件和有效期】
低温运输，2-8℃保存，有效期≥1年。
【注意事项】
1、本产品限科学研究使用。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
【产品基本信息和用途】
辣根过氧化物酶（Horseradish Peroxidase, HRP）是一种糖蛋白，从辣根（Horseradish）中提取。HRP分子量为44,000，等电点为pI 3～9，是一个球状分子，被血红素铁分成远端区和近端区。血红素铁与HRP共价连接。HRP的纯度通常可通过A403与A280的比值（RZ值）来检测。然而，不同的同工酶在相同纯度下会有不同的RZ值。适合HRP酶催化的pH值因供氢体不同而稍有差异，但多在pH 5左右。已知叠氮化钠，氰化物，L-胱氨酸，重铬酸盐，亚乙基硫脲，羟基胺，硫化物，钒酸，对氨基苯甲酸等能够抑制HRP活性，Cd2+，Co2+，Cu2+，Fe3+，Mn2+，Ni2+和Pb2+离子具有酶活抑制作用。HRP在组织化学染色和诊断分析中被广泛用作报告酶。在有机合成中，HRP被用于聚合反应、氧化脱氢反应和磺化氧化反应。HRP还被用作电化学生物传感器，在生物修复系统中用于降解合成染料等。
【应用举例】
高碘酸盐法抗体交联
1、将HRP溶解于含有8mM高碘酸钠的0.1M碳酸钠中，浓度为1mg/mL；
2、室温放置2小时，使HRP被充分氧化；
3、按HRP:IgG=1:7(mg/mg)的比例加入过量的IgG，然后加入HRP和IgG总质量1/6的干燥Sephadex，以破坏未反应的高碘酸盐；
4、室温孵育3小时；
5、过滤去除Sephadex，保留溶液；
6、加入l/20 体积的新鲜硼氢化钠溶液（5 mg/ml，溶解在0.1 mM氢氧化钠中），半小时后重复加入3/20 体积的新鲜硼氢化钠溶液，保持1小时。
7、用50%硫酸铵沉淀HRP-IgG偶联物，未交联的自由IgG用Con A亲和层析（PBS-NaC1平衡）去除，结合在柱上的HRP-IgG用0.01 M &α-甲基D-吡喃甘露糖苷洗脱。
参考文献：1. Anal Biochem. 1984 Feb;136(2):451-7;
参考文献：2. Arch Virol. 1982;74(4):277-91.
【酶活定义】
在25 ℃，pH7.0时，每分钟催化转化一个微摩尔过氧化氢的酶量。
【产品组分】
冻干粉，无添加成分。
【质量指标】
项目 | 指标 |
来源 | 辣根 |
分子量 | 44kDa |
活性 | ≥250U/mg |
RZ值 | 2.5-4.0 |
外观 | 褐色结晶性冻干粉状 |
【运输、储存条件和有效期】
低温运输，2-8℃保存，有效期≥1年。
【注意事项】
1、本产品限科学研究使用。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
质量指标
| Purity（SDS-PAGE） | ≥90% |
| Activity（Guaiacol method） | ≥250U/mg |
| RZ （The RZ is defined as the ratio of the absorbance at 403 nm to the absorbance at 275 nm. This value is an expression of the ratio of hemin to protein content. ） | 2.5 - 4.0 |
| Appearance | Freeze-dried powder |
MSDS
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