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疫苗分离纯化技术解决方案

发布时间:2021-06-07 点击数:66
疫苗生产过程中不可避免的有一些杂质,如细菌菌体、细胞碎片、血清、杂蛋白、核酸等。为了得到具有高纯度、无菌性和安全性的疫苗,要除去这些杂质。
传统疫苗的分离纯化方法    
连续离心、沉淀、过滤或萃取等物理、化学方法。我国采用酸沉淀法生产百日咳灭活疫苗,就是由菌体培养液加甲醛杀菌灭活后,用HCl调pH至3.8~4.4,静置十几小时自然沉淀出菌体和可溶性抗原,再离心、洗涤而得。
1 盐析    
盐析一般是指溶液中加入无机盐类而使某种物质溶解度降低而析出的过程。如:加浓(NH4)2SO4使蛋白质凝聚的过程。盐析可以通过各种物质的溶解度的不同进行分离,但是溶解度相同或差异不大很难进行分离。
   
2 酸沉淀    
酸沉淀是指溶液的pH改变,使得溶液中某些物质的溶解度降低,从而凝聚沉淀。过酸容易使得蛋白质变性。
3 超速离心    
蔗糖、CsCl、KBr密度梯度离心。处理样品量太少、操作复杂、难以控制。
   
采用此技术纯化嗜血流感细菌(Haemophilus influenzae)外膜脂蛋白P6,先连续离心(9000g)收获菌体超声破碎,再高速离心(21000g)沉淀出肽聚糖和含有P6的未破碎细胞,最后超速离心(100000g)除去肽聚糖,加压透析得到目的抗原组分。
现代分离纯化技术    
膜过滤、分子筛层析、离子交换层析、亲和层析等。
1 膜过滤    
膜过滤是一种与膜孔径大小相关的筛分过程,以膜两侧的压力差为驱动力,以膜为过滤介质,在一定的压力下,当原液流过膜表面时,膜表面密布的许多细小的微孔只允许水及小分子物质通过而成为透过液,而原液中体积大于膜表面微孔径的物质则被截留在膜的进液侧,成为浓缩液,因而实现对原液的分离和浓缩的目的。
   
2 分子筛层析(凝胶过滤层析)    
使用有一定大小孔隙的凝胶作层析介质(如葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等),利用凝胶颗粒对分子量和形状不同的物质进行分离的层析技术。由于各种分子的大小、形状不同,扩散到凝胶孔隙内的速度不同,因而通过层析柱的快慢不同而分离。
   
3 离子交换层析    
固定相是离子交换剂的层析分离技术。样品中待分离的溶质离子,与固定相上所结合的离子交换,不同的溶质离子与离子交换剂上离子化的基团的亲和力和结合条件不同,洗脱液流过时,样品中的离子按结合力的弱强先后洗脱。在生物化学和分子生物学领域此法常用于分离蛋白质、核酸等生物大分子。
   
4 亲和层析    
利用分子与其配体间特殊的、可逆性的亲和结合作用而进行分离的一种层析技术。可以选用生物化学、免疫化学或其他结构上吻合等亲和作用而设计的各种层析分离方法。如用寡脱氧胸苷酸-纤维素分离纯化信使核糖核酸;用DNA-纤维素分离依赖DNA的DNA聚合酶;用琼脂糖-抗体制剂分离抗原;用金属螯合柱分离带有成串组氨酸标签的重组蛋白质等。
   
西宝生物提供该实验所需的仪器设备,订购产品请联系热线:400-021-8158    
Miragen离心机系列    
型号
主要技术指标
Miragen 16M微型高速离心机C0160
● 转速:1000-14,000rpmrpm
● 最大容量:18 x 1.5/2.0 ml
● 最大离心力:16,000 x g
● 时间控制:1 to 30 分钟或者连续
● "Quick"按钮进行瞬时启动
Miragen 迷你型微孔板离心机C1000
● 容量:2 PCR 板
● 转速:2500 rpm
● 离心力:500 g
● 转子:垂直固定
Miragen Mini 掌上型离心机C1301
● 最大转速:6,000rpmrpm
● 最大容量:八排管转子:2x0.2ml八排管; 标准转子:6×1.5/2.0mL
● 最大离心力:2,000 x g
● 关闭盖子旋转,开盖即停止
Miragen 24D 微型高速离心机C2400
● 转速:500-13,300rpm
● 最大容量:24 x 1.5/2.0 ml
● 最大离心力:16,300 x g
● 时间控制:1~30 minutes or continuous
● "Quick"按钮进行瞬时启动
美国Labnet离心机系列    
型号
优势
PCR板迷你离心机
● 可以置于冷库中工作
● 快速离下挂壁液滴
● PCR实验前后使用,显著改善实验 结果
● 适用带裙边、不带裙边及各种标准PCR微孔板
● 体积不到大多数微孔板离心机体积的1/4
Spectrafuge 24D 微型高速离心机
● 全新的空气循环系统防止转头过热
● 转子设计合理,有24个孔位
● 强力的无刷马达驱动转头可以迅速加速到设定转速
Prism高速台式离心机
● 采用无碳刷强力电机和直观的操作控制面板
● 采用风冷设计
● 速度显示有rpm和rcf两种方式
● 使用设计独特的24x1.5/2.0mL转子
Spectrafuge Mini 迷你离心机
● 非常适用于微管过滤和快速离心
● 适用于1.5mL、0.5mL和0.4mL的离心管及0.2mL八联管、单个PCR管
● 标配含有转子和适配器。
Spectrafuge 6C 离心机
● 本款离心机主要是为血液分离而设计的
● 可在冷库中使用
● 也适用于化学分析样品、尿沉淀、染色体组DNA粒化等
Prism R 微型高速冷冻离心机
● 最新"速冷"功能在8分钟内把温度降到4℃
● 不平衡检测系统、自动停止功能
● 加速到最大速度小于16秒、降回零速小于18秒。
● 两年免费保修。
欢迎来电咨询,服务热线:400-021-8158